镁骨组织工程支架的打印制备及性能特征(2)

孔隙率测试：采用阿基米德排水法测量多孔镁支架的孔隙率[25]。取经超声清洗和干燥处理后且体积规则的试样，选择乙醇作比重液，将试样浸泡在乙醇中足够时间，抽真空至无气泡，使得试样的孔道被乙醇充分填充，然后将试样取出，测量试样浸泡前后的相关参数，通过公式(1)计算支架的孔隙率：

式中：Pk为样品的孔隙率；mw为试样浸入乙醇后的质量；md为试样干质量；V0为试样的几何体积；ρw为乙醇的密度。

力学性能分析：取烧结处理后的多孔镁支架，用水砂纸打磨至1 200号，然后用超声清洗并干燥。利用万能材料试验机对试样进行静态压缩力学性能测定，加载方向垂直于打印平面，加载速率为0.5 mm/min。

体外降解实验：生物环境降解实验采用9 g/L的生理盐水，将试样在温度为(37.)℃，振荡转速为1.25 r/s的恒温振荡摇床中培养，试样表面积与浸泡液比值为0.2 cm2/mL。浸泡时间分别为1，3，5，7，15，20，25和30 d，采用电子天平称试样质量，并用pH计测量浸泡液的pH值。通过式(2)计算支架的平均降解速率[26]：

式中：m0为试样的初始质量(g)；mt为降解t周后试样烘干的质量(g)；ρ为金属密度(g/cm3)；s为试样原表面积(cm2)；t为浸泡时间(h)。

1.5 主要观察指标 多孔镁支架的宏观和微观形貌、力学性能及降解性能。

1.6 统计学分析 各组实验独立重复5次，采用EXCEL 2010统计软件进行分析处理所得的全部实验数据。

2 结果 Results

2.1 多孔镁支架的外观结构、微观形貌与孔隙率 支架的多孔结构可为细胞提供附着的场所和营养物质交换的通道[27]。如图2所示为多孔镁支架的三维结构轮廓，观察到支架由规则圆柱状丝条堆积而成，测得丝径与孔隙均为(450±50)μm，侧面孔为矩形，长×宽≈500 μm×300 μm，层与层之间存在(50±5)μm的重叠。宏观结构中存在规则均匀、连通性好的孔洞，形成一级孔隙；微观结构中均匀分布微米级的孔洞，形成二级孔隙，该级孔隙主要是由于支架烧结过程中，有机物挥发而镁晶粒未能及时填充造成。通过阿基米德排水法测得支架的孔隙率为(65.)%。研究表明当支架孔隙为200-500 μm时，有利于微血管和骨细胞的长入与附着，促进新骨生成与重建，以及加快营养物质代谢[28]，故实验制备的双层次孔隙结构的支架满足仿形、物质交换、细胞增殖的要求。

2.2 多孔镁支架烧结前后的物相分析 图3所示为多孔镁支架烧结前后的X射线衍射分析图谱，经过对2个图谱主要波峰对比可知，烧结前后主要物相为镁，由于镁易氧化，烧结后生成少量的氧化镁，最终得到结晶度较高的多孔镁支架。

2.3 多孔镁支架的力学性能 在高温烧结过程中，支架的有机物和水分挥发，镁颗粒致密和结晶，使得支架具有一定的力学强度。图4为孔隙率为(65.)%的支架在不同烧结温度下的扫描电镜微观形貌，在450，500 ℃较低温度下，镁颗粒粒径小，形成的烧结颈小，周围存在相当大的空隙，烧结进行得不充分(图4A，B)；随着烧结温度的升高，在550 ℃条件下，镁颗粒之间结合力呈现出极大值，提高了颗粒间的联结强度，到一定保温时间，形成最大烧结颈，实现充分烧结(图4C)；温度继续升高到600 ℃，超过极大值温度后，出现气孔微增的倾向，同时晶粒增大，比表面能降低，不利于颗粒之间的联结，表现为材料的致密程度下降，造成过烧的现象(图4D)。

取不同高温烧结下孔隙率(65.)%的多孔镁支架进行抗压强度测试，550 ℃时平均抗压强度最大，达到(0.)MPa，力学性能满足松质骨所需0.2-80.0 MPa的要求[29]。任意选取一支架的压力-位移曲线如图5所示，位移逐渐增大的过程中压力突然下降，表明支架局部发生断裂，之后又开始上升，表明支架局部断裂未导致整体失稳，能为细胞生长和繁殖提供必要的强度支撑[30-31]。

2.4 多孔镁支架的降解性能 图6显示在降解过程中，支架表面微观形貌随时间的变化情况，从第5天开始，支架表面出现网状裂纹与点蚀坑，表面同时附着细短的针状团聚物；到30 d时，裂纹变宽、点蚀坑变大，团聚物变粗大，形成疏松的沉积层，同时采用能谱测试了材料腐蚀表面的元素组成。采用X 射线衍射仪测定腐蚀表面的物相组成，表明该团聚物主要为Mg(OH)2，该疏松沉积层的面积一直随时间延长而增加，见图7。图8为依据式(2)计算得到的支架平均降解速率变化曲线，随着浸泡时间的延长，支架降解不断的进行，降解速率逐渐趋于平稳，平均降解速率为(10.)mm/年。图9为支架降解过程中浸泡液pH值随时间的变化曲线，0-5 d，随着浸泡时间的延长，浸泡液的pH值逐渐增大，说明支架降解产生的碱性降解产物主要在这个阶段从支架扩散到溶液中；5 d后趋于平稳，pH值保持在10.。

文章来源：《烧结球团》 网址: http://www.sjqtzz.cn/qikandaodu/2021/0409/458.html